Descripción:
El sistema de capuchón ScriptCap™ m 7 G cataliza la adición in vitro de un nucleótido de capuchón al extremo 5' del ARN primario con un grupo 5'-trifosfato, como el ARN obtenido mediante una reacción de transcripción in vitro . Un "nucleótido de capuchón" o "capuchón" es un nucleósido de guanina que se une, a través de su carbono 5', a un grupo trifosfato que, a su vez, se une al carbono 5' del nucleótido más 5' del transcrito de ARNm primario. En la mayoría de los eucariotas, el nitrógeno en la posición 7 de la guanina del nucleótido de capuchón está metilado.
El sistema de protección ScriptCap™ m 7 G cataliza secuencialmente tres reacciones enzimáticas diferentes: (1) la ARN trifosfatasa escinde el trifosfato 5' del ARN en un difosfato. (2) la ARN guaniltransferasa une GTP al difosfato 5' del nucleótido más 5' (N1) del ARN. (3) la guanina-7-metiltransferasa, utilizando S -adenosil-metionina (SAM o AdoMet) como cofactor, cataliza la metilación del nitrógeno 7 de la guanina en el nucleótido de la protección.
Este proceso, conocido como "capping", mejora la estabilidad y la eficiencia de la traducción del ARN en comparación con el ARN sin capping. El ARN capping producto de un sistema de capping ScriptCap™ m 7 G presenta una estructura "Cap 0". El ARN Cap 0 puede convertirse a una estructura "Cap 1" in vitro mediante el uso de la 2'-O-metiltransferasa ScriptCap™ de CELLSCRIPT™ en la reacción de capping junto con el sistema de capping ScriptCap™ m 7 G. Además de tener un nucleótido de capping 7-metil-G (m 7 G), el ARN Cap 1 también presenta un grupo 2'-O-metilo en el penúltimo nucleótido 5' (N1), lo que puede aumentar aún más la eficiencia de la traducción in vivo del ARNm .
Una reacción estándar del sistema de capuchón ScriptCap™ m 7 G capuchea aproximadamente 60 μg de ARN, pero las reacciones se pueden aumentar o reducir según las necesidades del usuario. El ARN capuchado de una reacción del sistema de capuchón ScriptCap™ m 7 G se puede añadir directamente a una reacción de poli(A) polimerasa CELLSCRIPT™ A-Plus™ para la poli(A)-cola en los extremos 3' del ARN capuchado.
Detalles:
País de origen: Estados Unidos
Tipo de industria: Investigación
Paquete: 25 reacciones
Características:
Almacenamiento: -20°C
Garantía: Por defecto directo CTR
Marca: Cellscript
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